生物潔凈室無菌工藝模擬試驗是采用微生物培養基代替產品對無菌工藝進行評估的驗證技術。無菌工藝模擬試驗也被稱為培養基灌裝或培養基灌裝試驗，通常需要將培養基暴露于設備、容器密封系統的表面和關鍵環境條件中，并模擬實際生產完成工藝操作。然后將裝有培養基的密封容器進行培養以檢查微生物的生長，并對結果進行評價，以確定實際生產中產品被污染的概率。

　　培養基灌裝試驗需要模擬整個工藝過程，包括從部件、材料的滅菌準備，配制混合，無菌過濾，灌裝，一直到完成容器密封的整個過程。培養基灌裝是用于評估整個無菌工藝過程，用以表明如果嚴格按照工藝要求生產，產品的無菌性有可靠保證；但須承認，不管模擬試驗還是實際生產總是存在差異的，因此不能將培養基灌裝結果與實際生產中的污染概率等同起來，即使獲得很好的培養基灌裝結果，也不能排除實際生產發生污染的可能性。

　　培養基灌裝應在實際生產相同的條件(環境、設備等)下盡量模擬實際生產完成操作。應充分考慮生產時可能造成污染的各種因素，應對常規生產中的各種干擾活動進行模擬，應模擬常規生產可能遇到的較差條件狀況下的操作。

　　1.生物潔凈室培養基灌裝技術

　　培養基的選擇和處理，培養基灌裝試驗頻率，生產線較長允許運行時間(長時間生產可能導致污染增加)，班次更換、暫停及必要的更衣，灌裝批次量，生產線的運行速度及設置，實際生產可能出現的正常干擾次數、類型及復雜程度，以及非常規的干擾和活動(如設備維修、中斷、設備的各種調整)，環境監測方案和取樣操作，關鍵區域內較多可容納的總人數及人員可能的活動，容器的密封系統(如規格、大小、類型、對設備的兼容性)，無菌條件下的運輸、轉移次數(如容器轉移、加膠塞、加無菌原輔材料)，只有經過培養基灌裝的人員才能參與實際無菌生產，培養基灌裝后應隨即對生產設施和設備清洗和滅菌，避免殘留培養基造成污染。

　　2.生物潔凈室培養基灌裝培養基的選擇

　　胰酪大豆胨液體培養基(TSB)是一種廣譜性培養基，特別對無菌工藝環境中源自人體的細菌、芽孢和真菌有良好的促生長效果，是無菌工藝模擬試驗常用的培養基。如果產品需充入惰性氣體、儲存在無氧條件，無菌操作在嚴格的厭氧環境(即氧氣濃度低于0.1%)中進行時，應評估是否采用厭氧培養基。在厭氧的無菌工藝環境監控中反復發現厭氧微生物或在產品無菌檢查中發現厭氧微生物時，需評估增加厭氧培養基。用于模擬抑菌性產品的培養基，如有必要需評估抑菌性產品對其促生長能力及模擬試驗結果的影響。促生長試驗的指示菌除了相關規定以外，還應考慮使用環境監控和無菌檢查中的分離菌，以代表實際生產中的可能遇到的污染菌，促菌生長試驗的接種量應不超過100CFU。